Allergen Elisa II Kit für Mandeln
- Allergennachweis in stark verarbeiteten und erhitzten Lebensmitteln
- Hohe Sensitivität (LOD: 0,31 ppm)
- Hohe Spezifität
- Einfach zu verwendende Protokolle
Verpackungseinheit: 1 Stk. |
Die ELISA-Kits sind Sandwich-Enzym-Immunoassays, für die quantitative Bestimmung einzelner Proteine allergener Zutaten in frischen oder (hoch) verarbeiteten Lebensmitteln. Die Kits sind für die Verwendung durch Qualitätskontrollpersonal oder andere geschulte Fachkräfte für die Allergenüberwachung in der Produktion oder für Produktfreigabekontrollen vorgesehen.
Vor dem Test werden die Proteine in den Proben extrahiert, zentrifugiert und filtriert. Das Antigen wird an die mit polyklonalen Antikörpern beschichteten Vertiefungen des Mikroplattenmoduls gebunden, wodurch ein Antigen-Antikörper-Komplex entsteht. Anschließend wird der Enzym-konjugierte Antikörper an den bereits gebundenen Antigen-Antikörper-Komplex gebunden, wodurch ein Antikörper-Antigen-Antikörper-Sandwich entsteht.
Die Zugabe von Enzymsubstrat führt zu einer Farbentwicklung, deren Intensität durch die Absorption bei 450 nm bestimmt wird. Die Intensität der Farbentwicklung ist direkt proportional zur Proteinkonzentration der Allergene im Lebensmittel.
1 x 96 Wells einer Mikrotiterplatte (12 Streifen mit 8 Wells)
Zugehörige Puffer und Enzyme
Messzeit:
Probenvorbereitungszeit: ca. 10 min
Extraktionszeit: ca. 30 min, oder über Nacht
ELISA-Analyse: ca. 2 Stunden
Assay-Sensitivität: 0,31 ppm (μg Protein/ g Lebensmittel)
Nachweisgrenzen: 0,78 – 50ppb Protein
Lagerung: Bei 2-8°C (35-46°F), NICHT EINFRIEREN
Arbeitstemperatur: 20-30°C
Kit Komponenten:
Extraktionsverfahren
Schnelles Extraktionsverfahren
Die Proben zermahlen/zerkleinern
1,0 g Probe in ein Probenröhrchen einwiegen, 19 mL Probenextraktionslösung hinzufügen.
Das verschlossene Probenröhrchen 10 Minuten lang in kochendem Wasser inkubieren.
Das Probenröhrchen abkühlen lassen und 30 Sekunden lang vortexen.
Den pH-Wert auf 6,0-8,0 einstellen.
Zentrifugieren und den Überstand filtrieren, falls erforderlich.
Probenextrakt 20-fach mit Verdünnungslösung I verdünnen.
Über-Nacht-Extraktionsmethode
Die Proben zermahlen / zerkleinern
1,0 g Probe in ein Probenröhrchen einwiegen, 19 mL Probenextraktionslösung hinzufügen.
Das Probenröhrchen waagerecht auf einem Schüttler befestigen und über Nacht bei Raumtemperatur schütteln.
Den pH-Wert auf 6,0-8,0 einstellen.
Zentrifugieren und filtrieren Sie den Überstand, falls erforderlich.
Probenextrakt 20-fach mit Verdünnungsmittel I verdünnen.
ELISA-Verfahren
100 μL Standardlösung und Probenlösung in ein Well der Platte pipettieren.
Die Platte 1 Stunde lang bei 20-30°C (68-86°F) inkubieren.
Die Wells 6-mal mit Waschlösung waschen.
100 μL enzymkonjugierten Antikörper (F) auftragen.
Die Platte 30 Minuten lang bei 20-30 °C inkubieren (68-86 °F).
Die Wells 6-mal mit Waschlösung waschen.
100 μL Enzymsubstrat (G) zugeben.
Die Reaktion 20 Minuten lang bei 20-30°C (68-86°F) im Dunkeln inkubieren.
Die Enzymreaktion durch Zugabe von 100 μl Stopplösung (H) stoppen.
Die Absorption bei 450 nm messen.
Die Konzentration des nachweisbaren Proteins anhand der Standardkurve berechnen.