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Allergen Elisa II Kit für Erdnuss

Artikel-Nr.: 15000082-001
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  • Allergennachweis in stark verarbeiteten und erhitzten Lebensmitteln
  • Hohe Sensitivität (LOD: 0,31 ppm)
  • Hohe Spezifität
  • Einfach zu verwendende Protokolle

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Die ELISA-Kits sind Sandwich-Enzym-Immunoassays, für die quantitative Bestimmung einzelner Proteine allergener Zutaten in frischen oder (hoch) verarbeiteten Lebensmitteln. Die Kits sind für die Verwendung durch Qualitätskontrollpersonal oder andere geschulte Fachkräfte für die Allergenüberwachung in der Produktion oder für Produktfreigabekontrollen vorgesehen.

Vor dem Test werden die Proteine in den Proben extrahiert, zentrifugiert und filtriert. Das Antigen wird an die mit polyklonalen Antikörpern beschichteten Vertiefungen des Mikroplattenmoduls gebunden, wodurch ein Antigen-Antikörper-Komplex entsteht. Anschließend wird der Enzym-konjugierte Antikörper an den bereits gebundenen Antigen-Antikörper-Komplex gebunden, wodurch ein Antikörper-Antigen-Antikörper-Sandwich entsteht.

Die Zugabe von Enzymsubstrat führt zu einer Farbentwicklung, deren Intensität durch die Absorption bei 450 nm bestimmt wird. Die Intensität der Farbentwicklung ist direkt proportional zur Proteinkonzentration der Allergene im Lebensmittel.

1 x 96 Wells einer Mikrotiterplatte (12 Streifen mit 8 Wells)
Zugehörige Puffer und Enzyme

Messzeit:
Probenvorbereitungszeit: ca. 10 min
Extraktionszeit: ca. 30 min, oder über Nacht
ELISA-Analyse: ca. 2 Stunden
Assay-Bereich: 0,31 - 20 ppm (μg Protein/ g Lebensmittel)
Lagerung: Bei 2-8°C (35-46°F), NICHT EINFRIEREN
Arbeitstemperatur: 20-30°C (alle Lösungen sollten äquilibriert werden)

Extraction Procedure
Short time extraction method
Grind/mince the samples
Weigh 1.0 g sample in a tube, add 19 mL Sample Extraction Solution.
Incubate capped tube in boiling water for 10 minutes.
Cool down the tube and vortex for 30 sec.
Adjust pH to 6.0-8.0.
Centrifuge and filter the supernatant if necessary.
Dilute Sample Extract 20-fold with Diluent I.
Overnight Extraction Method
Grind/mince the samples
Weigh 1.0 g sample in a tube, add 19 mL Sample Extraction Solution.
Fix the tube to a shaker horizontally, and oscillate at room temperature overnight.
Adjust pH to 6.0-8.0.
Centrifuge and filter the supernatant if necessary.
Dilute Sample Extract 20-fold with Diluent I.
ELISA procedure
Pipette 100 μL Working Standard and Working Sample Solution into a well on the microplate.
Incubate the microplate for 1 hour at 20-30°C (68-86°F).
Wash the wells 6 times with Washing Solution.
Dispense 100 μL Enzyme-conjugated Antibody (F).
Incubate the microplate for 30 min at 20-30°C (68-86°F).
Wash the wells 6 times.
Dispense 100 μL Enzyme Substrate (G).
Incubate reaction for 20 min at 20-30°C (68-86°F) in the dark.
Stop the enzyme reaction by adding 100 μL Stop Solution (H).
Measure absorbance at 450 nm.
Calculate the concentration of detectable protein using standard curve.