Checklite ATP eliminating Kit
- Speziell entwickelte ATP-abbauende Enzyme
- Hochsensitiver Assay für mikrobielle Biomasse
- Einfach zu handhaben
- Schnelle Ergebnisse
| Verpackungseinheit: 1 Stk. |
Das CheckLite ATP Eliminating Kit wird für Untersuchungen der mikrobiellen Biomasse auf Grundlage der ATP-Messmethode verwendet. Alle lebenden Zellen, einschließlich Mikroorganismen, nutzen ATP als Energiequelle. Daher kann die Gesamtzellmasse durch Messung der Biolumineszenz mit der Luciferase-Reaktion bestimmt werden. Normalerweise wird dazu ATP aus der Probe, mit dem ATP-freisetzenden Reagenz, wie beispielsweise im CheckLite 250 Plus, extrahiert. Voraussetzung dafür ist aber ist, dass das extrazelluläre ATP niedrig ist.
Ein großes Problem ist jedoch, dass das extrazelluläre ATP in manchen Proben um mehrere Größenordnungen höher sein kann, was den empfindlichen Nachweis von intrazellulärem ATP behindert. Das ATP Eliminating Reagenz eliminiert extrazelluläres ATP auf sehr niedrige Konzentrationen und ermöglicht den gezielten Nachweis von Bakterien.
1 x 250 Tests
Testdauer: 30-40 Min.
Lagerung: 2-8°C, NICHT EINFRIEREN
Kit-Zusammensetzung
ATP-Eliminierungsreagenz: 5 Fläschchen rötlich-rosa-markiert
Rekonstitutionspuffer für ATP-Eliminierungsreagenz: 5 Fläschchen mit gelber Beschriftung
Vorbereitung des Reagenzes
Das ATP-Eliminierungsreagenz wird unter Vakuum in einem rötlich-rosa beschrifteten Fläschchen aufbewahrt.
Geben Sie den Rekonstitutionspuffer aus dem gelb markierten Fläschchen in das geöffnete rot-rosa markierte Fläschchen und lassen Sie es einige Minuten bei Raumtemperatur stehen.
Rühren Sie das Fläschchen vorsichtig um, damit sich kein Schaum bildet, bis der Inhalt vollständig aufgelöst ist.
Berühren Sie den Rand des Fläschchens oder die Oberseite des Gummistopfens nicht direkt mit den Händen, da dies manchmal den Blindwert des Reagenzes erhöhen kann.
Ein Fläschchen ATP-Eliminierungsreagenz kann unter normalen Bedingungen für mehr als 50 Assays verwendet werden.
Hinweise zur Handhabung der Proben
Die ATP-Konzentration in lebenden Zellen ändert sich schnell. Extrahieren Sie daher ATP aus den Zellen oder frieren Sie die Zellen unmittelbar nach der Probenahme ein. Auch im Falle einer Extraktion kann die Hemmung oder Zerstörung von ATP-abbauenden Enzymen erforderlich sein, um zu verhindern, dass Enzyme die ATP-Konzentration verringern.
Vorbehandlung der Proben
Feste Proben:
Die Probe wird mit einem Stomacher oder einem Homogenisator behandelt und der Überstand für die folgende Messung verwendet.
Flüssige Proben:
Wenn die Probenlösung trüb oder gefärbt ist oder hemmende Ionen wie Cl- enthält, verdünnen Sie die Probe nach Bedarf.
ATP-Abbau von Proben
Geben Sie 1 ml der Probe in das Probenröhrchen.
0,1 ml ATP-Abbaureagenz in das Probenröhrchen geben und gut mischen.
Lassen Sie das Probenröhrchen 30 bis 40 Minuten bei Raumtemperatur stehen. Um eine gute Reproduzierbarkeit zu erreichen, ist es wichtig, die Reaktionszeit konstant zu halten. Werden mehrere Probenröhrchen getestet, sollte jedes Probenröhrchen für die gleiche Zeit bei Raumtemperatur stehen.
Nach der Reaktion bei Raumtemperatur werden die Proben für den nachfolgenden Biolumineszenztest verwendet.