CheckLite ATP Eliminating Kit

Extraktionsverfahren

Vorbereitung des Reagenzes

• Das ATP-Eliminierungsreagenz wird unter Vakuum in einem rötlich-rosa beschrifteten Fläschchen aufbewahrt.
• Geben Sie den Rekonstitutionspuffer aus dem gelb markierten Fläschchen in das geöffnete rot-rosa markierte Fläschchen und lassen Sie es einige Minuten bei Raumtemperatur stehen.
• Rühren Sie das Fläschchen vorsichtig um, damit sich kein Schaum bildet, bis der Inhalt vollständig aufgelöst ist.
• Berühren Sie den Rand des Fläschchens oder die Oberseite des Gummistopfens nicht direkt mit den Händen, da dies manchmal den Blindwert des Reagenzes erhöhen kann.
• Ein Fläschchen ATP-Eliminierungsreagenz kann unter normalen Bedingungen für mehr als 50 Assays verwendet werden.

Hinweise zur Handhabung der Proben

• Die ATP-Konzentration in lebenden Zellen ändert sich schnell. Extrahieren Sie daher ATP aus den Zellen oder frieren Sie die Zellen unmittelbar nach der Probenahme ein. Auch im Falle einer Extraktion kann die Hemmung oder Zerstörung von ATP-abbauenden Enzymen erforderlich sein, um zu verhindern, dass Enzyme die ATP-Konzentration verringern.

Vorbehandlung der Proben

• Feste Proben:
• Die Probe wird mit einem Stomacher oder einem Homogenisator behandelt und der Überstand für die folgende Messung verwendet.
• Flüssige Proben:
• Wenn die Probenlösung trüb oder gefärbt ist oder hemmende Ionen wie Cl- enthält, verdünnen Sie die Probe nach Bedarf.

ATP-Abbau von Proben

• Geben Sie 1 ml der Probe in das Probenröhrchen.
• 0,1 ml ATP-Abbaureagenz in das Probenröhrchen geben und gut mischen.
• Lassen Sie das Probenröhrchen 30 bis 40 Minuten bei Raumtemperatur stehen. Um eine gute Reproduzierbarkeit zu erreichen, ist es wichtig, die Reaktionszeit konstant zu halten. Werden mehrere Probenröhrchen getestet, sollte jedes Probenröhrchen für die gleiche Zeit bei Raumtemperatur stehen.
• Nach der Reaktion bei Raumtemperatur werden die Proben für den nachfolgenden Biolumineszenztest verwendet.