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Compact Dry LM    Prodotto

Compact Dry LM è una lastra cromogenica pronta all'uso indicata per l'individuazione dello Listeria monocytogenes

download New Compact Dry LM for detection of L.monocygotones .pdf

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Contesto

È importante rilevare e determinare la carica batterica nei prodotti alimentari e nell?ambiente per monitorarne il grado di pulizia e la sicurezza sanitaria. Il metodo convenzionale che utilizza il metodo agar richiede molto tempo e operazioni complesse come la preparazione di un agar caldo, miscelazione e diluizione uniforme e/o con sbavatura.

Compact Dry LM è un mezzo semplificato per la rilevazione e l?enumerazione del Listeria monocytogenes, che riduce sia i tempi di eccitazione, sia il numero di operazioni.

Caratteristiche e vantaggi

1) Piastrina piccola e compatta: Ha bisogno solo di un piccolo spazio fisico per l?immagazzinamento, i test e l?incubazione.

2) Piastrina pronta da usare e portabile: Non c?è bisogno di preparare il mezzo, il che elimina lo spreco del mezzo stesso e di avere un apparato per prepararlo. Consigliato per test di emergenza o su campo.

3) Il campione si diffonde automaticamente e uniformemente nella piastrina.

4) Facile da conservare: Può essere conservato fino a diciotto (18) mesi a temperatura ambiente.

5) Può essere misurato dopo l?incubazione per 24-48 ore.

6) Si possono osservare le colonie rosse con o senza bordi blu che si presume possano contenere Listeria monocytogenes tramite substrati cromogenici, e la cattura delle colonie è facile.

Uso previsto

Questo prodotto deve essere usato da microbiologi per la rilevazione e l?enumerazione di Listeria monocytogenes nel cibo e in campioni a esso relativi.

Procedura Operativa per la Rilevazione

Preparazione del preparato

1) Rilevazione su prodotti alimentari solidi, acqua o prodotti alimentari liquidi
Aggiungere 9 volte il volume del brodo mezzo Fraser al campione e omogeneizzare con un omogeneizzatore. Incubare a 30 + 1? per 25 + 1 ore per la cultura di arricchimento.

2) Rilevazione su campioni ottenuti per strofinamento
Aggiungere 9 volte il volume del brodo mezzo Fraser alla soluzione di pulitura. Incubare a 30 + 1? per 25 + 1 ore per la cultura di arricchimento.
Guida

1) Aprire l?astuccio di alluminio e prendere un set di 4 piastrine.

2) Staccare la quantità necessaria dal set di quattro, piegando avanti e dietro e premendo contemporaneamente il coperchio.

3) Togliere il coperchio della piastrina e versare una goccia di 1 ml di diluente sterilizzato (es. salino) al centro di un foglio secco per trasformare tutto il foglio in gel.

4) Versare 0,1 ml di cultura di arricchimento al centro del foglio. Strisciare il foglio con l?inoculo insieme a un anello dall?alto in basso delicatamente e spargere su tutto il foglio in modo da ottenere colonie singole.

5) Girare la piastrina chiusa dopo aver rimesso il coperchio e incubare per 24 + 2 ore a 37 + 1 ?. Se si evidenziano colonie di Listeria monocytogenes, in questo stadio si può interrompere l?incubazione. Se non si evidenziano, incubare per altre 24 + 2 ore a 37 + 1 ?.

Procedura Operativa per l?Enumerazione

Preparazione del preparato

1) Conteggio praticabile in prodotti alimentari solidi
Aggiungere 9 volte il volume di soluzione acquosa con peptone tamponato (BPW ISO) al campione e omogeneizzare con un omogeneizzatore. Pipettare 1 ml di preparato omogeneizzato (da diluirsi successivamente se necessario) al centro di un foglio asciutto di Compact Dry LM.

2) Conteggio praticabile in acqua o prodotti alimentari liquidi Pipettare 1 ml di campione liquido (da diluirsi successivamente se necessario) al centro di un foglio asciutto di Compact Dry LM.

3) Conteggio praticabile su campioni ottenuti per strofinamento Inoculare 1 ml di soluzione pulente (da diluirsi successivamente se necessario) al centro di un foglio asciutto di Compact Dry LM. Si raccomanda l?uso di un tampone Compact Dy

Guida

1) Aprire l?astuccio di alluminio e prendere un set di 4 piastrine.

2) Staccare la quantità necessaria dal set di quattro, piegando avanti e dietro e premendo contemporaneamente il coperchio. Usare un set di quattro piastrine collegate quando è inoculata una serie di campioni diluiti.

3) Togliere il coperchio della piastrina e versare 1 ml di preparato al centro del foglio asciutto. Il preparato si diffonde automaticamente e omogeneamente su tutto il foglio (di dimensioni medie di 20 cm2) e lo trasforma in gel.

4) Girare la piastrina chiusa dopo aver rimesso il coperchio e incubare per 24 + 2 ore a 37 + 1 ?. Se si evidenziano colonie di Listeria monocytogenes, in questo stadio si può interrompere l?incubazione. Se non si evidenziano, incubare per altre 24 + 2 ore a 37 + 1 ?.

Precauzioni d?uso

Precauzioni per la Rilevazione e l?Enumerazione

1) Durante l?inoculazione, non toccare la superficie del mezzo e/o la punta del gocciolatore, ed evitare attentamente ogni contaminazione da microrganismi che possano cadere.

2) Durante l?incubazione, mantenere ben chiuso il coperchio del Compact Dry per evitare possibili deidratazioni.

3) Si raccomanda di usare un sacchetto stomacher con filtro per eliminare i rischi di trascinamento di piccoli pezzi di prodotto alimentare sulla superficie del mezzo.
Precauzioni per la Rilevazione

4) Durante lo strisciamento, non applicare troppa forza sull?anello e lasciarlo scivolare dolcemente sulla superficie del foglio. Un anello con un ampio diametro e una superficie liscia è adatto allo strisciamento.
Precauzioni per l?Enumerazione

5) Il preparato deve essere diluito in una soluzione tampone fino a un livello di concentrazione inferiore a 300 cfu/piastrina.

6) Se venissero inoculati batteri per più di 10 to 4 cfu in una piastrina, non si formerebbero colonie indipendenti e l?intero mezzo risulterebbe macchiato.

7) Se la natura del preparato dovesse influire sul risultato, il preparato deve essere inoculato solo dopo l?eliminazione delle cause di questa influenza, diluendolo o in altri modi. Per esempio: preparati con un?alta viscosità, colore profondo, o un pH troppo basso o troppo alto.

Interpretazione nella Rilevazione

1) Interpretare le colonie rosse con o senza bordo blu come presunti positivi rispetto a Listeria monocytogenes.

2) Se il volume di Listeria monocytogenes è eccessivo, non si formeranno colonie singole, ma tutto il foglio o le parti strisciate del foglio appariranno rosse. Interpretare come possibile positivo anche in questo caso.
Interpretazione nell?Enumerazione

3) Contare le colonie rosse con o senza bordi blu come presunti positivi rispetto a Listeria monocytogenes.
Interpretazione nella Rilevazione e nell?Enumerazione

4) Se si osservano presunte colonie di L. monocytogenes , effettuare test di conferma seguendo gli ISO11290-1:2017, ISO11290-2:2017 o altri metodi.

Precauzioni per l?interpretazione

1) Anche la Listeria ivanovii forma colonie rosse con o senza bordi blu, proprio come L. monocytogenes.

2) Listeria spp. tranne che per L. monocytogenes e L. ivanovii forma colonie blu/verde. Altri batteri diversi da Listeria spp. sono inibiti da agenti selettivi nel mezzo, o non formano colonie colorate anche se crescono. Raramente alcuni Bacillus spp. potrebbero formare colonie piatte e arancioni relativamente grandi.

3) L. monocytogenes può formare colonie arancioni, marroni-rossastre o viola-rossastre oltre alle colonie rosse.

4) Un foglio bianco posizionato sotto la piastrina può facilitare l?osservazione delle colonie.

5) La piastrina ha una superficie di 20 cm2, e la parte posteriore del contenitore ha una griglia con maglie di 1 cm x 1 cm per rendere più facile il conteggio delle colonie. Quando è difficile contare le colonie perché sono troppo numerose quelle cresciute sul mezzo, la quantità batterica totale può essere ottenuta moltiplicando per 20 un numero medio di colonie per maglia (1 cm x 1 cm) calcolato su maglie rappresentative.





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