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Compact Dry LM    Producto

Compact Dry LM es una placa cromogenica lista para usar para el recuento total de Listeria monocytogenes

download New Compact Dry LM for detection of L.monocygotones .pdf

download CompactDry- LM-Detection-IllustrationManual.pdf


Uso recomendado

Este producto está destinado a ser usado por microbiólogos para la detección y enumeración de Listeria monocytogenes en productos alimentarios y muestras relacionadas.

Procedimiento operativo para la detección

Preparación del espécimen

1) Detección en productos alimentarios sólidos, agua o productos alimentarios líquidos
Añadir 9 veces el volumen de caldo Fraser semi a la muestra y homogeneizar con Homogeneizador. Incubar a 30 + 1? durante 25 + 1 horas para medio de enriquecimiento.

2) Detección en muestra recogida

Añadir 9 veces el volumen de caldo Fraser semi a la solución de recogida. Incubar a 30 + 1? durante 25 + 1 horas para medio de enriquecimiento.

Instrucciones

1) Abra el estuche de aluminio y saque un juego de 4 placas.

2) Desprenda la cantidad que necesite de un juego de cuatro doblando hacia arriba y hacia abajo al tiempo que presiona la tapa.

3) Quite la tapa de la placa y añada 1 ml de un diluyente esterilizado (por ej. salino=) en medio de una lámina seca para transformar toda la hoja en gel.

4) Añada 0,1 ml de medio de enriquecimiento en medio de la lámina. Raye suavemente la lámina con el inóculo de arriba a abajo en bucle, distribuyendo por toda la lámina para obtener colonias únicas.

5) De la vuelta a la placa tapada después de volver a poner la tapa y luego incube durante 24 + 2 horas a 37 + 1 ?. Si las colonias de L. monocytogenes son evidentes, puede detenerse la incubación en este punto. Si no son evidentes, incube durante 24 + 2 horas más a 37 + 1 ?.


Procedimiento operativo para la enumeración

Preparación del espécimen

1) Recuento viable en productos alimentarios sólidos
Añadir 9 veces el volumen de agua de peptona tamponada a la muestra y homogeneizar con Homogeneizador. Pipetear 1mL de espécimen homogeneizado (para seguir diluyendo si es necesario) en medio de una lámina seca de Compact Dry LM.

2) Recuento viable en agua o productos alimentarios líquidos
Pipetear 1 ml de muestra líquida (para seguir diluyendo si es necesario) en medio de una lámina seca de Compact Dry LM.

3) Recuento viable en muestra recogida
Inocular 1 ml de muestra de recogida (para seguir diluyendo si es necesario) en medio de una lámina seca de Compact Dry LM. Se recomienda utilizar un hisopo Compact Dry
Instrucciones

1) Abra el estuche de aluminio y saque un juego de 4 placas.

2) Desprenda la cantidad que necesite de un juego de cuatro doblando hacia arriba y hacia abajo al tiempo que presiona la tapa. Use un juego de cuatro placas conectadas al inocular una serie de muestras diluidas.

3 )Quite la tapa a la placa y deposite 1 ml de espécimen en medio de una lámina seca. El espécimen se distribuye en la totalidad de la lámina de forma automática y homogénea (tamaño medio de 20 cm2) para transformarla en gel.

4) De la vuelta a la placa tapada después de volver a poner la tapa y luego incube durante 24 + 2 horas a 37 + 1 ?. Si las colonias de L. monocytogenes son evidentes, puede detenerse la incubación en este punto. Si no son evidentes, incube durante 24 + 2 horas más a 37 + 1 ?.

Precauciones de uso

Precauciones para la detección y la enumeración

1) Durante la inoculación, no toque la superficie del medio ni la punta del cuentagotas y tenga cuidado de evitar cualquier contaminación por microorganismos del entorno.

2) Durante la incubación, mantenga bien cerrada la tapa de Compact Dry para evitar cualquier posible deshidratación.

3) Se recomienda usar una bolsa Stomacher con filtro para eliminar riesgos de transmisión de fragmentos de productos alimentarios a la superficie del medio.
Precaución para la detección

4) Durante el rayado, no ejerza fuerza sobre el asa y deslícela suavemente por la superficie de la lámina. Un asa bacteriológica de gran diámetro y superficie lisa es adecuada para el rayado.

Precaución para la enumeración

5) Debe diluirse el espécimen con solución tampón hasta un nivel de concentración inferior a 300 cfu/placa.

6) Si se inoculan bacterias por encima de 104 cfu en una placa, no se formarán colonias independientes y se teñirá todo el medio.

7) Si la naturaleza del espécimen no afecta al resultado, debe inocularse el espécimen solo después de eliminar la causa por medios como la dilución u otros. Por ejemplo, especímenes con alta viscosidad, color intenso o pH demasiado alto o bajo.

Interpretación en la detección

1) Interprete las colonias rojas con o sin borde azul como positivo presuntivo para Listeria monocytogenes.

2) Si un volumen de L. monocytogenes es excesivo, no se formarán colonias individuales y la totalidad de la lámina o la parte rayada de la lámina se volverá de color rojo. En este caso también se interpretan los resultados como positivo presuntivo.
Interpretación en la enumeración

3) Cuente colonias rojas con o sin borde azul para L. monocytogenes presuntiva.
Interpretación en la detección y enumeración

4) Si se observan colonias presuntivas de L. monocytogenes , realizar pruebas de confirmación según ISO11290-1:2017, ISO11290-2:2017 u otros métodos.

Precaución para la interpretación

1) Listeria ivanovii también forma colonias rojas con o sin borde azul, como L. monocytogenes.

2) Listeria spp., excepto con L. monocytogenes y L. ivanovii, forman colonias azules/verdes. Las bacterias que no sean Listeria spp. son inhibidas por agentes selectivos en el medio o no forman colonias coloreadas aunque crezcan. En raras ocasiones, ciertas Bacillus spp. pueden formar colonias naranjas, planas y relativamente grandes.

3) L. monocytogenes puede formar colonias de color naranja, marrón rojizo o rojo púrpura, además de rojas.

4) Colocar la placa sobre un papel blanco puede facilitar la observación de colonias.

5) El tamaño de la placa LM es de 20 cm2, y la parte posterior del recipiente tiene una rejilla grabada de 1 cm x 1 cm para facilitar el recuento de colonias. Cuando el recuento de colonias sea complicado debido al gran número crecido en el medio, puede obtenerse el conteo bacteriano multiplicando por 20 el número promedio de colonias por rejilla (1 cm x 1 cm) calculado a partir de rejillas representativas.






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